一、實驗概述
Transwell 是一種實驗技術,主要用于研究細胞侵襲、細胞遷移、共培養、細胞趨化等。這項技術的主要材料是 Transwell 小室( Transwell chamber , Transwell insert ),其外形為一個可放置在孔板里的小杯子,不同廠家對 Transwell 會有不同的命名,而不同型號也可有不同形狀,不同大小,根據實驗需要,可有不同選擇。
但無論是何種外形,其關鍵部分都是一致的,那就是杯子底層的一張有通透性的膜 ,而杯子其余部分的材料與普通的孔板是一樣。這層膜帶有微孔,孔徑大小有 0.1 - 12.0μm ,根據不同需要可用不同材料,一般常用的是聚碳酸酯膜 ( polycarbonate membrane )。
將 Transwell 小室放入培養板中,小室內稱上室,培養板內稱下室,上室內盛裝上層培養液,下室內盛裝下層培養液,上下層培養液以聚碳酸酯膜相隔。
我們將細胞種在上室內,由于聚碳酸酯膜有通透性,下層培養液中的成分可以影響到上室內的細胞,從而可以研究下層培養液中的成分對細胞生長、運動等的影響。

Transwell 原理圖
二、實驗應用
應用不同孔徑和經過不同處理的聚碳酸酯膜,就可以進行共培養 、細胞趨化 、細胞遷移 、細胞侵襲等多方面的研究。 當然不同細胞其體積不同,具體選擇時要考慮到細胞大小。這里我們以最見的侵襲、遷移為例,描述transwell實驗:
(1)transwell細胞遷移實驗
常用 8.0 、 12.0μm 膜,上室種腫瘤細胞,下室加入 FBS 或某些特定的趨化因子,腫瘤細胞會向營養成分高的下室跑,計數進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的遷移能力。
(2)transwell細胞侵襲實驗
常用 8.0 、 12.0μm 膜,原理與腫瘤細胞遷移 實驗類似。
上室種腫瘤細胞,下室加入 FBS 或某些特定的趨化因子,腫瘤細胞會向營養成分高的下室跑,但與腫瘤細胞遷移實驗不同的是,聚碳酸酯膜上室側鋪上一層基質膠 ,用以模仿體內細胞外基質,細胞欲進入下室,先要分泌基質金屬蛋白酶( MMPs )將基質膠降解,方可通過聚碳酸酯膜。計數進入下室的細胞量可反映腫瘤細胞的侵襲能力。

Transwell檢測細胞侵襲






